Sr. Editor: El método de referencia para el serotipado de Streptococcus pneumoniae es el test de Quellung1. Esta técnica consiste en una reacción de precipitación entre antisueros específicos y el antígeno polisacárido de la bacteria que hace visible microscópicamente su cápsula. Debido a la necesidad de personal experimentado para su realización, suele quedar relegada a muy pocos laboratorios especializados. Recientemente, se ha desarrollado un procedimiento complementario basado en la aglutinación por partículas de látex sensibilizadas2. Este método puede ser suficiente para la detección de algunos serotipos, pero en otros casos sólo llega a la identificación de serogrupo. Tras la introducción de la vacuna neumocócica conjugada3 es posible que surjan cambios en la distribución de los serotipos de S. pneumoniae. La detección de estos cambios requiere de un seguimiento de los serotipos causantes de enfermedad. El objetivo de este estudio fue evaluar esta nueva técnica de aglutinación (Pneumotest-Latex; Statens Serum Institut; Copenhague, Dinamarca) para la serotipificación de S. pneumoniae. Se estudió una colección de 148 cepas de S. pneumoniae aisladas entre enero de 2005 y mayo de 2007 en distintos casos de enfermedad neumocócica invasora (135 cepas procedían de hemocultivo, 8 de líquido cefalorraquídeo, 4 de líquido pleural y 1 de líquido ascítico). La reacción de Quellung, que fue considerada el patrón de referencia como método de tipificación, se llevó a cabo empleando el panel de sueros distribuido por el Statens Serum Institut (Copenhague, Dinamarca)4. La sero tipificación por Pneumotest-Latex se realizó, siguiendo las recomendaciones del fabricante2, a partir de cultivos en Todd Hewitt Broth (Oxoid) incubados 1824 h a 37 °C5. Con el fin de eliminar las coincidencias por azar, la concordancia entre Pneumotest-Latex y el test de Quellung se estimó calculando el índice Kappa (IK).
Las 148 cepas se distribuyeron según Pneumotest-Latex en 21 serotipos-serogrupos. La reacción de Quellung clasificó estas cepas en 30 serotipos-serogrupos (Tabla 1). Aunque en algunos casos Pneumotest-Latex no llegó a concretar el serotipo, sí identificó correctamente (según su grado de discriminación) 147 de las 148 cepas (99,3%; κ = 0,993; p < 0,001). Una cepa que resultó inicialmente no tipificable por Pneumotest-Latex fue confirmada por el test de Quellung como serotipo 6A (esta cepa, pese a que tras ser retesteada por látex se asignó al serogrupo 6, se consideró un fallo de esta técnica).
Tabla 1. Distribución de resultados de tipificación según la técnica de látex y la de referencia
| Pneumotest-Latex | Reacción de Quellung | Acuerdo entre técnicas (hasta el grado de discriminación de Pneumotest-Latex) | ||
| Serotipos | N.° de cepas | Serotipos | N.° de cepas | |
| 1 | 26 | 1 | 26 | Sí: serotipo 1 |
| 3 | 13 | 3 | 13 | Sí: serotipo 3 |
| 4 | 5 | 4 | 5 | Sí: serotipo 4 |
| 5 | 16 | 5 | 16 | Sí: serotipo 5 |
| No tipificable 6 (6A,6B) | 16 | 6A6B | 52 | Una cepa no tipificable no coincideEl resto sí: serogrupo 6 |
| 7 (7F, 7A, 7B, 7C) | 16 | 7 (7F, 7A, 7B, 7C) 7F | 214 | Sí: serogrupo 7 |
| 8 | 5 | 8 | 5 | Sí: serotipo 8 |
| 9 (9A, 9L, 9N, 9V) | 8 | 9N9V | 44 | Sí: serogrupo 9 |
| 10 (10F, 10A, 10B, 10C) | 1 | 10A | 1 | Sí: serogrupo 10 |
| 12 (12F, 12A, 12B) | 1 | 12 (12F, 12A, 12B) | 1 | Sí: serogrupo 12 |
| 14 | 14 | 14 | 14 | Sí: serotipo 14 |
| 15 (15F, 15A, 15B, 15C) | 5 | 15A15B | 23 | Sí: serogrupo 15 |
| 16 (16F, 16A) | 2 | 16 (16F, 16A) | 2 | Sí: serogrupo 16 |
| 18 (18F, 18A, 18B, 18C) | 5 | 18C | 5 | Sí: serogrupo 18 |
| 19 (19F, 19A, 19B, 19C) | 9 | 19A19F | 72 | Sí: serogrupo 19 |
| 20 | 1 | 20 | 1 | Sí: serotipo 20 |
| 22 (22F, 22A) | 4 | 22 (22F, 22A) | 4 | Sí: serogrupo 22 |
| 23 (23F, 23A, 23B) | 3 | 23A23B23F | 111 | Sí: serogrupo 23 |
| 25 (25F, 25A) | 2 | 25 (25F, 25A) | 2 | Sí: serogrupo 25 |
| 33 (33F, 33A, 33B, 33C, 33D) | 1 | 33 (33F, 33A, 33B, 33C, 33D) | 1 | Sí: serogrupo 33 |
| (29, 34, 35 [35F, 35A, 35B, 35C], 42, 47) | 4 | 3435B35F | 121 | Sí: serogrupo 35 (Pneumotest-Latex no excluye otros serogrupos como 29, 34, 42 y 47) |
Entre paréntesis, serotipos no discriminados.
En negrita, serotipos incluidos en la vacuna conjugada heptavalente.
La inmunización frente a S. pneumoniae ocasiona un descenso de la incidencia de enfermedad invasora, pero puede favorecer el incremento de serotipos no vacunales6. Aunque en España únicamente la Comunidad de Madrid ha implantado la vacuna conjugada heptavalente en el calendario infantil7, una considerable proporción de niños pueden estar inmunizados como consecuencia de recomendaciones individuales. Para evaluar las posibles variaciones causadas por la vacunación, resulta necesario potenciar la identificación de los diferentes serotipos8. Esto podría facilitarse mediante el uso de técnicas simples y rápidas. La técnica aquí evaluada mostró una excelente concordancia con el procedimiento de referencia. Esta alta concordancia no es de extrañar teniendo en cuenta que ambos métodos utilizan anticuerpos de una misma procedencia. Aunque la confirmación definitiva de algunos serotipos precisa ser efectuada mediante el test de Quellung, nuestros resultados coinciden con los de otros autores2 y apuntan a que el empleo de Pneumotest-Latex resulta muy útil como método inicial de tipificación. Si bien no debe considerarse una alternativa excluyente respecto al test de Quellung, dada su comodidad y accesibilidad a personal menos entrenado y su capacidad para la correcta identificación de serogrupos, su uso puede reducir enormemente el número de determinaciones que realizar por esta técnica de referencia. Entre sus limitaciones hay que destacar, además de la falta de poder discriminativo dentro de determinados serogrupos, su elevado precio.
AgradecimientosA los servicios de microbiología de los hospitales públicos y privados de la Comunidad de Madrid que colaboran en el Sistema de Vigilancia de la Enfermedad Invasora por Streptococcus pneumoniae en esta región.
