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Además, el número de afectados crece a un ritmo anual del 6,5%<a class="elsevierStyleCrossRef" href="#bib0060"><span class="elsevierStyleSup">2</span></a>. La aparición de los nuevos agentes antivirales directos con altas tasas de eficacia ha modificado radicalmente el pronóstico de los pacientes, aunque a un coste económico muy elevado<a class="elsevierStyleCrossRef" href="#bib0065"><span class="elsevierStyleSup">3</span></a>.</p><p id="par0010" class="elsevierStylePara elsevierViewall">En estos tratamientos, la cuantificación de la carga viral es un indicador básico a la hora de establecer la eficacia o la duración del tratamiento<a class="elsevierStyleCrossRef" href="#bib0070"><span class="elsevierStyleSup">4</span></a>. Hemos evaluado la relación entre el tiempo de conservación de las muestras con un inóculo viral pequeño y la cuantificación de la viremia mediante un estudio experimental simple ciego, con 25 muestras de sangre —anticoagulada con EDTA— de pacientes sin infección por el virus, inoculadas con una cantidad conocida del mismo virus (aproximadamente 2.300 UI/ml de un virus genotipo 1b aislado de un paciente de nuestro hospital). Tras agitación de la muestra, se hicieron 3 alícuotas y se procesaron de forma diferente: la primera fue centrifugada inmediatamente y el plasma congelado a –80<span class="elsevierStyleHsp" style=""></span>°C (método de referencia); la segunda y la tercera fueron sometidas al mismo procedimiento tras incubaciones a 25<span class="elsevierStyleHsp" style=""></span>°C de 6 y 24<span class="elsevierStyleHsp" style=""></span>h, respectivamente. Se cuantificó el número de copias virales mediante COBAS<span class="elsevierStyleSup">®</span>Ampliprep/COBAS<span class="elsevierStyleSup">®</span> TaqMan<span class="elsevierStyleSup">®</span> HCV Quantitative v2.0 (Roche Diagnostics). Las 3 alícuotas de cada muestra inicial fueron analizadas en la misma serie analítica.</p><p id="par0015" class="elsevierStylePara elsevierViewall">Tras el análisis de los datos mediante el programa SPSS v.19, se calcularon las medias de las diferencias y los coeficientes de correlación intraclase (CCI), comparando las cargas virales en las muestras almacenadas 6 y 24<span class="elsevierStyleHsp" style=""></span>h a 25<span class="elsevierStyleHsp" style=""></span>°C frente a las muestras de referencia (congeladas a las 0<span class="elsevierStyleHsp" style=""></span>h); además, se compararon entre sí las muestras almacenadas 6 y 24<span class="elsevierStyleHsp" style=""></span>h (<a class="elsevierStyleCrossRef" href="#tbl0005">tabla 1</a>).</p><elsevierMultimedia ident="tbl0005"></elsevierMultimedia><p id="par0020" class="elsevierStylePara elsevierViewall">La media/desviación estándar de carga viral de los 3 experimentos fue: 2.321/635; 2.130/609, y 1.706/362 copias/ml, respectivamente<span class="elsevierStyleBold">.</span> Tras 6 y 24<span class="elsevierStyleHsp" style=""></span>h a 25<span class="elsevierStyleHsp" style=""></span>°C, la carga viral sufre una disminución, en promedio, de 191 UI/ml (9,13%) y de 615 UI/ml (26,9%), respectivamente (<a class="elsevierStyleCrossRef" href="#tbl0005">tabla 1</a>). Aplicando los criterios de Fleiss<a class="elsevierStyleCrossRef" href="#bib0075"><span class="elsevierStyleSup">5</span></a>, los niveles de concordancia con la carga viral de referencia son regular-buena para la medida tras 6<span class="elsevierStyleHsp" style=""></span>h a 25<span class="elsevierStyleHsp" style=""></span>°C, pero se observa una baja concordancia tras 24<span class="elsevierStyleHsp" style=""></span>h a 25<span class="elsevierStyleHsp" style=""></span>°C (<a class="elsevierStyleCrossRef" href="#tbl0005">tabla 1</a>).</p><p id="par0025" class="elsevierStylePara elsevierViewall">Nuestro estudio confirma la necesidad de establecer un sistema de extracción y transporte de las muestras que asegure que estas no permanecen mucho tiempo a temperatura ambiente, ya que de lo contrario disminuye el ARN viral presente en la muestra<a class="elsevierStyleCrossRef" href="#bib0080"><span class="elsevierStyleSup">6</span></a>. Existen resultados discrepantes en la literatura; algunos autores han comunicado que el ARN viral es estable a temperatura ambiente, pero generalmente estos trabajos están realizados con concentraciones virales elevadas, del orden de 10<span class="elsevierStyleSup">6</span><span class="elsevierStyleHsp" style=""></span>UI/ml —lo que no se corresponde con la situación clínica de pacientes que reciben tratamiento antiviral<a class="elsevierStyleCrossRef" href="#bib0085"><span class="elsevierStyleSup">7</span></a>— o estudian la estabilidad del ARN del VHC en la muestra ya procesada (centrifugada y separada), lo que tampoco coincide con la realidad de la práctica clínica<a class="elsevierStyleCrossRef" href="#bib0090"><span class="elsevierStyleSup">8</span></a>. Otros estudios que incluyen concentraciones bajas de virus indican estabilidad viral a 4<span class="elsevierStyleHsp" style=""></span>°C durante unas 72<span class="elsevierStyleHsp" style=""></span>h<a class="elsevierStyleCrossRef" href="#bib0080"><span class="elsevierStyleSup">6</span></a>, pero en diferentes contextos no tan exigentes como el planteado con los nuevos tratamientos<a class="elsevierStyleCrossRef" href="#bib0095"><span class="elsevierStyleSup">9</span></a>.</p><p id="par0030" class="elsevierStylePara elsevierViewall">Nuestro trabajo señala que la fase preanalítica puede afectar negativamente de forma significativa al mismo y por tanto, en algunos casos, estos errores metodológicos pueden influir en el manejo clínico de los pacientes, ya que pequeñas variaciones en los resultados analíticos pueden hacer cambiar la actitud terapéutica<a class="elsevierStyleCrossRef" href="#bib0100"><span class="elsevierStyleSup">10</span></a>. Por tanto, para dar fiabilidad a los datos que condicionan el tratamiento de estos pacientes, es imprescindible controlar las variables que puedan influir en los resultados de la cuantificación viral, como el tiempo que transcurre hasta la centrifugación de la muestra y la temperatura de conservación de la muestra durante el transporte, ya que el elevado coste que estos nuevos tratamientos suponen para el sistema sanitario obliga a que se utilicen con la máxima eficiencia.</p></span>" "pdfFichero" => "main.pdf" "tienePdf" => true "multimedia" => array:1 [ 0 => array:7 [ "identificador" => "tbl0005" "etiqueta" => "Tabla 1" "tipo" => "MULTIMEDIATABLA" "mostrarFloat" => true "mostrarDisplay" => false "tabla" => array:3 [ "leyenda" => "<p id="spar0010" class="elsevierStyleSimplePara elsevierViewall">CCI: coeficiente correlación intraclase; IC: intervalo de confianza; SD: desviación estándar.</p>" "tablatextoimagen" => array:1 [ 0 => array:2 [ "tabla" => array:1 [ 0 => """ <table border="0" frame="\n \t\t\t\t\tvoid\n \t\t\t\t" class=""><thead title="thead"><tr title="table-row"><th class="td" title="table-head " align="" valign="top" scope="col" style="border-bottom: 2px solid black"> \t\t\t\t\t\t\n \t\t\t\t</th><th class="td" title="table-head " align="left" valign="top" scope="col" style="border-bottom: 2px solid black">Media de las diferencias UI/ml (IC 95%) \t\t\t\t\t\t\n \t\t\t\t</th><th class="td" title="table-head " align="left" valign="top" scope="col" style="border-bottom: 2px solid black">SD \t\t\t\t\t\t\n \t\t\t\t</th><th class="td" title="table-head " align="left" valign="top" scope="col" style="border-bottom: 2px solid black">CCI (IC 95%) \t\t\t\t\t\t\n \t\t\t\t</th></tr></thead><tbody title="tbody"><tr title="table-row"><td class="td-with-role" title="table-entry ; entry_with_role_rowhead " align="left" valign="top">Entre 0 y 6<span class="elsevierStyleHsp" style=""></span>h \t\t\t\t\t\t\n \t\t\t\t</td><td class="td" title="table-entry " align="char" valign="top">−212,0 (–474,10; 50,10) \t\t\t\t\t\t\n \t\t\t\t</td><td class="td" title="table-entry " align="char" valign="top">634,00 \t\t\t\t\t\t\n \t\t\t\t</td><td class="td" title="table-entry " align="char" valign="top">0,457 (0,099; 0,714) \t\t\t\t\t\t\n \t\t\t\t</td></tr><tr title="table-row"><td class="td-with-role" title="table-entry ; entry_with_role_rowhead " align="left" valign="top">Entre 6 y 24<span class="elsevierStyleHsp" style=""></span>h \t\t\t\t\t\t\n \t\t\t\t</td><td class="td" title="table-entry " align="char" valign="top">−412,88 (–645,77; –179,99) \t\t\t\t\t\t\n \t\t\t\t</td><td class="td" title="table-entry " align="char" valign="top">564,21 \t\t\t\t\t\t\n \t\t\t\t</td><td class="td" title="table-entry " align="char" valign="top">0,256 (–0,079; 0,564) \t\t\t\t\t\t\n \t\t\t\t</td></tr><tr title="table-row"><td class="td-with-role" title="table-entry ; entry_with_role_rowhead " align="left" valign="top">Entre 0 y 24<span class="elsevierStyleHsp" style=""></span>h \t\t\t\t\t\t\n \t\t\t\t</td><td class="td" title="table-entry " align="char" valign="top">−624,88 (–871,95; –377,81) \t\t\t\t\t\t\n \t\t\t\t</td><td class="td" title="table-entry " align="char" valign="top">598,56 \t\t\t\t\t\t\n \t\t\t\t</td><td class="td" title="table-entry " align="char" valign="top">0,207 (–0,101; 0,519) \t\t\t\t\t\t\n \t\t\t\t</td></tr></tbody></table> """ ] "imagenFichero" => array:1 [ 0 => "xTab1270984.png" ] ] ] "notaPie" => array:1 [ 0 => array:3 [ "identificador" => "tblfn0005" "etiqueta" => "a" "nota" => "<p class="elsevierStyleNotepara" id="npar0005">Modelo alfa de 2 factores y efectos mixtos con acuerdo absoluto.</p>" ] ] ] "descripcion" => array:1 [ "es" => "<p id="spar0005" class="elsevierStyleSimplePara elsevierViewall">Media de las diferencias de carga viral en UI/ml y su desviación estándar; coeficiente correlación intraclase<a class="elsevierStyleCrossRef" href="#tblfn0005"><span class="elsevierStyleSup">a</span></a>. Entre paréntesis se indica el intervalo de confianza al 95% tanto de la media de las diferencias como del coeficiente correlación intraclase</p>" ] ] ] "bibliografia" => array:2 [ "titulo" => "Bibliografía" "seccion" => array:1 [ 0 => array:2 [ "identificador" => "bibs0005" "bibliografiaReferencia" => array:10 [ 0 => array:3 [ "identificador" => "bib0055" "etiqueta" => "1" "referencia" => array:1 [ 0 => array:2 [ "contribucion" => array:1 [ 0 => array:2 [ "titulo" => "Detection of low HCV viraemia by repeated HCV RNA testing predicts treatment failure to triple therapy with telaprevir" "autores" => array:1 [ 0 => array:2 [ "etal" => true "autores" => array:6 [ 0 => "B. Maasoumy" 1 => "B. Cobb" 2 => "B. Bremer" 3 => "K. Luk" 4 => "P. Halfon" 5 => "S. Aslam" ] ] ] ] ] "host" => array:1 [ 0 => array:2 [ "doi" => "10.1111/apt.12544" "Revista" => array:6 [ "tituloSerie" => "Aliment Pharmacol Ther." 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Carta científica
Influencia de la conservación de la muestra en la cuantificación del ARN viral de la hepatitis C
Influence of sample conservation on quantification of Hepatitis C Virus RNA
María Carmen Bernal-Sorianoa,
, Adelina Gimenoa, Jose Sánchez-Payab,c, Joaquín Portillac,d
Autor para correspondencia
a Servicio de Microbiología, Hospital General Universitario de Alicante, Alicante, España
b Servicio de Medicina Preventiva, Hospital General Universitario de Alicante, Alicante, España
c Universidad Miguel Hernández, Elche, Alicante, España
d Servicio de Enfermedades Infecciosas, Hospital General Universitario de Alicante, Alicante, España
Artículo
Este artículo está disponible en español
Influencia de la conservación de la muestra en la cuantificación del ARN viral de la hepatitis C
María Carmen Bernal-Soriano, Adelina Gimeno, Jose Sánchez-Paya, Joaquín Portilla
10.1016/j.eimc.2015.12.012Enferm Infecc Microbiol Clin. 2016;34:689-90