POSTERS - SALA LA CANDELARIA
Área Biológica
Viernes, 18 de junio, 9:00-20:30
Debate de 18.30 a 20.30 en Sala Santa María
Moderadores:
D.ª Mónica de la Fuente del Rey (Madrid)
D. Alberto Machado de la Quintana (Sevilla)
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CAMBIOS CON LA EDAD EN LOS MECANISMOS DE ACCION DEL NPY SOBRE LA FUNCION FAGOCITICA DE MACROFAGOS
Medina, S.; Del Río, M.; Hernanz, A.; De la Fuente, M.
Departamento de Fisiología Animal. Facultad de Ciencias Biológicas. Universidad Complutense de Madrid. Madrid.
Con el envejecimiento se produce una alteración en la respuesta inmunitaria explicable por cambios en la interacción entre los sistemas inmune y nervioso. Previamente demostramos que el efecto estimulador del neuropéptido Y (NPY) sobre la función fagocítica de macrógafos peritoneales de ratones adultos variaba con la edad. En el presente trabajo hemos profundizado en los mecanismos a través de los cuales el NPY (1012 a 108 M) puede ejercer estos efectos diferenciales. en ratones BALB/c machos adultos (24 ± 2 semanas) y viejos (72 ± 2 semanas) se estudió la producción de TNF* e IL-1ß, y los mecanismos de acción a nivel intracelular (AMPc y PKC) en ensayos de fagocitosis y valorando directamente los niveles de AMPc. Los resultados muestran una inhibición de la producción de TNF* (pg/ml) en respuesta a LPS con todas las concentraciones de NPY estudiadas en adultos (NPY 1012 M 521 ± 48; control 626 ± 49) y en viejos (NPY 1012 M 1.008 ± 85; control 1.200 ± 123). En cuanto a la producción de IL-1ß (pg/ml) en respuesta a Con A, se observa con NPY 1011 M una estimulación en adultos (129 ± 10; control 115 ± 10), mientras en viejos se da una inhibición (145 ± 25; control 192 ± 31). Respecto a los mecanismos intracelulares, encontramos resultados opuestos según estudiemos la población peritoneal total (macrófagos y linfocitos) o sólo fagocitos. Así, en estos últimos se observa un incremento significativo en los niveles de AMPc (pmol/108 cél) en adultos (53 ± 3 con NPY 1012 M respecto a 43 ± 9) relacionado con una disminución de la fagocitosis de macrófagos (175 ± 11 respecto a 223 ± 24), al contrario de lo que ocurre en muestras completas (macrófagos y linfocitos) en las que se observa una estimulación significativa de la fagocitosis que se corresponde con una disminución del AMPc y una estimulación de PKC. En viejos se obtuvieron resultados contrarios a los de adultos: una estimulación de la fagocitosis en muestras de macrófagos purificados (318 ± 17 con NPY 108 M frente a 270 ± 31) que se corresponde con un descenso en los niveles de AMPc (40 ± 5 frente a 51 ± 7), y un descenso de la fagocitosis en muestras completas que se corresponde con un aumento del AMPc y una disminución de la PKC. En conclusión, los efectos diferenciales que el NPY ejerce según la edad de los animales parecen deberse a cambios en la producción de citoquinas, TNF* e IL-1ß, y de segundos mensajeros.
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LA SUPLEMENTACION CON VITAMINAS ANTIOXIDANTES C Y E MEJORA LA FUNCIONALIDAD DE LOS NEUTROFILOS EN HOMBRES Y MUJERES ANCIANOS
Sánchez, C.; Vallejo, C.; Guayerbas, M.; Mateu, M. A.; Arnalich, F.; De la Fuente, M.
Departamento de Fisiología Animal. Facultad de Ciencias Biológicas. Universidad Complutense de Madrid. Madrid.
Objetivo: Ante el cada vez más aceptado papel inmunoestimulador de los antioxidantes nos planteamos comprobar el efecto modulador que la suplementación con vitaminas C y E, por separado y conjuntamente, podría tener en la funcionalidad de los fagocitos en la vejez, momento de la vida en el que se aprecia una inmunodepresión.
Metodología: Una población de 60 ancianos, con edades comprendidas entre los 70 y 80 años, se dividió en seis grupos: hombres y mujeres que ingirieron diariamente durante tres meses 500 mg de vitamina C y 200 mg de vitamina E, conjuntamente o por separado. Antes del tratamiento y al finalizar el mismo se analizaron diversas funciones de los neutrófilos de sangre periférica, aquellas más representativas de los mismos: su capacidad de adherencia al endotelio, la movilidad hacia el foco infeccioso o quimiotaxis, la ingestión de partículas extrañas y la producción de anión superóxido como primer radical libre en la destrucción del material ingerido.
Resultados: Tras el tratamiento aumenta la quimiotaxis y la fagocitosis disminuye la adherencia y la producción de anión superóxido. Las funciones que se estimulan lo hacen más en las mujeres que en los hombres, mientras que las que disminuyen lo hacen más en los hombres que en las mujeres. En general, en las mujeres la ingestión conjunta de vitaminas C y E produce los mayores efectos. Sin embargo, en los hombres la vitamina E tiene más efecto en las funciones estimuladas con el tratamiento y la vitamina C en los que se inhiben por el mismo.
Conclusiones: La suplementación vitamínica que se ha seguido durante tres meses modula la funcionalidad de los neutrófilos circulantes en los ancianos, disminuyendo aquellas funciones que se encuentran elevadas en la vejez, como es el caso de la adherencia al endotelio y la producción de anión superóxido, y aumentando aquellas que están más deprimidas, como sucede con la quimiotaxis y la fagocitosis.
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EFECTO DEL EJERCICIO FISICO EN LA FUNCION INMUNE DE ANCIANOS HIPERTENSOS
Sánchez, C.; Vallejo, C.; Medina, S.; Puerto, M.; Víctor, V. M.; De la Fuente, M.
Departamento de Fisiología Animal. Facultad de Ciencias Biológicas. Universidad Complutense de Madrid. Madrid.
Objetivos: En el envejecimiento se produce una alteración en la respuesta inmunitaria y dado que el ejercicio físico moderado mejora la función inmune en sujetos jóvenes, se ha querido comprobar si esta mejora podría darse en individuos en la década de los sesenta, en la que se manifiesta una inmunodepresión, y que además están diagnosticados de hipertensión y sometidos a tratamiento hipertensivo. Al mismo tiempo, se pretendía comprobar si la hipertensión y el tratamiento incidían en la función inmune de los individuos.
Metodología: Un grupo de 12 varones de 60-69 años, seleccionados a partir de una población mayor tras comprobarse que eran hipertensos y de vida sedentaria, llevaron a cabo un programa gratuito de actividad física basado en el desarrollo de la fuerza muscular durante un período de seis meses. Se valoró su estado inmunitario antes de iniciar el programa de ejercicio, a los dos meses del inicio, al finalizar el mismo (a los seis meses) y a los 12 meses (seis meses tras la finalización del programa, tiempo en el que no realizaron ejercicio físico alguno. Se estudió, a cada uno de esos tiempos, diferentes funciones de los tres tipos de células inmunocompetentes más representativas, obtenidas de sangre periférica: 1) los neutrófilos (capacidad de adherencia a endotelio, quimiotaxis, ingestión de partículas extrañas y producción de anión superóxido); 2) los linfocitos (capacidad de adherencia, quimiotaxis, respuesta proliferativa al mitógeno PHA y producción de Il-2), y 3) las células NK (actividad citotóxica frente a una línea tumoral K-562).
Resultados: Los niveles de función inmunitaria del grupo estudiado era diferente del de los controles normotensos de su edad. La capacidad de adherencia y la quimiotaxis era menor que la de los normotensos y la fagocitosis y producción de anión superóxido mayores. El efecto del ejercicio se manifestó aumentando la capacidad de quimiotaxis de los neutrófilos, la respuesta linfoproliferativa, la producción de IL-2 y la actividad NK, y disminuyendo la fagocitosis.
Conclusiones: Los hipertensos presentan cambios en algunas funciones inmunes en relación a los normotensos de la misma edad, los cuales indican un estado oxidativo en estos individuos. El programa de ejercicio de fuerza realizado por los hipertensos moduló el estado inmunitario de los mismos, mejorándolo significativamente, hecho que se aprecia ya a los dos meses del inicio del programa y de forma más significativa a la finalización del mismo, manteniéndose en algunos casos tras seis meses de inactividad física.
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ESTIMULACION DE LA FUNCION LINFOIDE Y LA ACTIVIDAD NK TRAS LA INGESTION DE ANTIOXIDANTES TIOLICOS EN UN MODELO MURINO DE ENVEJECIMIENTO PREMATURO
Miquel, J.*; Ferrández, M. D.; Puerto, M.; Del Río, M.; De la Fuente, M.
Departamento de Fisiología Animal. Facultad de Ciencias Biológicas. Universidad Complutense de Madrid. Madrid. * Departamento Interuniversitario de Óptica. Universidad de Alicante. Alicante.
Objetivo:
1. Comprobar si en ratones singénicos BALB/c se puede reproducir un modelo de envejecimiento prematuro que hemos publicado para ratones viejos Swiss (OF1) basado en la realización de una prueba de actividad exploratoria de un laberinto en T en un tiempo menor de 20 segundos. Esto nos permite clasificarlos en rápidos (los que lo hacen en ese tiempo o menos) y en lentos (los que tardan más). Estos últimos tienen una menor longevidad y un sistema inmune más envejecido, son animales con más edad biológica.
2. Puesto que los antioxidantes resultan potenciadores de la función inmune y de forma prioritaria en la vejez, se intenta comprobar si la ingestión de dos antioxidantes tiólicos (tiazolidín carboxílico, TC, y N-acetilcisteína, NAC) podría tener una acción potenciadora de la función inmune y si los efectos son diferenciales por ser animales lentos o rápidos.
Metodología: 40 ratones hembras de la cepa BAB/c con una edad e 70 semanas fueron clasificados en rápidos (R) y lentos (L) tras realizar las pruebas del laberinto en T durante cuatro semanas. Posteriormente la mitad de los R y de los L ingirieron los antioxidantes (A) (0,1% de TC + 0,1% NAC en el pienso) durante cuatro semanas (RA y LA) y la otra mitad no (controles: RC y LC). A las 78 semanas fueron sacrificados y se valoró la función linfoide (la quimiotaxis y la respuesta proliferativa al mitógeno ConA) y la citotoxicidad natural (NK), así como la producción de interleuquina 2 (IL-2) en células procedentes de ganglios axilares.
Resultados: Todas las funciones estudiadas siguieron el mismo patrón de respuesta: los animales lentos tenían una significativa menor capacidad inmune que los rápidos y los antioxidantes mejoraban significativamente la función inmune en ambos. Los índices de quimiotaxos fueron: RC (750 ± 50), LC (293 ± 48), RA (1.448 ± 262) y LA (494 ± 116), los de linfoproliferación (absorbancia): RC (0,314 ± 0,024), LC (0,193 ± 0,049), RA (0,429 ± 0,078) y LA (0,256 ± 0,041), los de actividad NK: RC (48 ± 5), LC (49 ± 4), RA (82 ± 5) y LA (66 ± 3), y la producción de IL-2 (pg/mL): RC (212 ± 31), LC (148 ± 24), RA (569 ± 59) y LA (746 ± 138).
Conclusiones: El modelo de envejecimiento prematuro se reproduce en una cepa sinérgica de ratones, teniendo los animales R mejor sistema inmune que los L, y la ingestión de antioxidantes tiólicos en estos animales viejos, tanto R como L, mejora la función inmune.
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MALONILDIALDEHIDO: UN POSIBLE MARCADOR DEL ENVEJECIMIENTO
Gil, P.; Fariñas, F.; Casado, A.*; López, M. A.*
Servicio de Geriatría. Hospital Clínico San Carlos. * Centro de Investigaciones Biológicas (CSIC). Madrid.
Objetivos: Analizar el comportamiento de las defensas antioxidantes y el estrés oxidativo en relación con la edad, mediante la medida de la actividad de dos enzimas barredoras de radicales libres de oxígeno (RLO): catalasa (CAT) y superóxido dismutasa (SOD), y de un producto directo de la lipoperoxidación lipídica: malonildialdehído (MDA).
Método: Se obtuvieron muestras de sangre venosa en ayunas de 119 individuos, con una edad media de 56,2 ± 31,3 años, rango= 0-101 años, 47 hombres y 72 mujeres. 19 eran neonatos en los que se obtuvo la muestra del cordón umbilical.
La actividad SOD se determinó mediante la técnica descrita por Minami y Yoshikawa. La actividad CAT según el método de Aebi. MDA se cuantificó mediante HPLC-UV, mediante una modificación del método descrito por Bull y Marnett. Los datos se analizaron mediante un paquete estadístico comercial (SPSS 6.12).
Resultados: En el análisis de regresión y ajuste rectilíneo/curvilíneo frente a la edad, sólo para MDA se obtuvo un coeficiente de regresión superior a 0,75 (p< 0,005). El mejor ajuste se obtuvo mediante una expresión exponencial, con la siguiente relación paramétrica:
[MDA] = 103,117 · e0,0021 · EDAD
donde [MDA] significa concentración de MDA intraeritrocitario (nmol/mg) y edad se mide en años. En la figura se representa gráficamente esta relación.
Conclusiones: Nuestros datos muestran que MDA aumenta exponencialmente con la edad, indicando que la edad avanzada está asociada con un mayor estrés oxidativo sistémico.
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EVALUACION DEL PERFIL CLINICO-BIOQUIMICO COMO INDICADOR DE MALNUTRICION
García Palacios, J.; González Carrocera, J. A.; De Pablos Martínez, A.; Piñón Pita, M.; Prieto Alonso, A.
Organismo Autónomo «Establecimientos Residenciales para Ancianos de Asturias». ERA. Consejería de Servicios Sociales y Departamento de Biología Funcional. Universidad de Oviedo. Oviedo. Principado de Asturias.
Los cuadros de malnutrición son muy frecuentes en individuos sometidos a nutrición enteral por tiempo prolongado. Se evaluó un grupo de ancianos inmovilizados en centros del ERA. Valoramos albúmina, prealbúmina, colesterol, proteínas totales, transferina y linfocitos, así como la pérdida de peso superior a un 10%, con el fin de identificar malnutrición después de seis meses de seguimiento en los siguientes grupos de ancianos:
A) Control alimentación oral (n =19, edad= 83,6, tiempo de inmovilización= 295 días).
B) Cocina (n= 7, edad= 85, tiempo de inmovilización= 756 días).
C) Fórmula (n= 5, edad= 68,8, tiempo de inmovilización= 549 días).
D) Mixta (n= 8, edad= 82,9, tiempo de inmovilización= 460 días).
todos con un índice de Katz= G.
| Colesterol | P. totales | Albúmina | Transferrina | Linfocitos | Prealbúmina | |
| Primer corte | ||||||
| A | 200,35 | 68,24 | 36,06 | 194,35 | 1,87 | 19,51 |
| B | 201 | 72 | 36 | 223 | 2,16 | 19,7 |
| C | 205 | 69,8 | 39 | 219 | 2 | 25,2 |
| D | 150 | 62,6 | 32 | 180 | 1,98 | 15,15 |
| Segundo corte | ||||||
| A | 197 | 71,3 | 37,7 | 186 | 1,8 | 20,5 |
| B | 176 | 67 | 33,5 | 184 | 1,5 | 13,08 |
| C | 213 | 71,4 | 41,2 | 207 | 1,7 | 29,1 |
| D | 140 | 64 | 32,7 | 185 | 1,9 | 17,1 |
Concluyendo, en el grupo C (alimentación fórmula) poseen los mejores indicadores bioquímicos de partida, manteniendo estables dichos indicadores al cabo de seis meses.
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ESTUDIO DEL EFECTO DEL DEPRENILO SOBRE EL DAÑO CAUSADO POR LA AXOTOMIA
Atiki, L.; Revuelta, Ml; Venero, J. L.; Machado, A.; Cano, J.
Departamento de Bioquímica, Bromatología y Toxicología y Medicina Legal. Facultad de Farmacia. Universidad de Sevilla. Sevilla.
El deprenilo es un fármaco ampliamente utilizado para el tratamiento de la enfermedad de Parkinson. En estos pacientes se han observado mejoras además de las relacionadas con la inhibición de la enzima monoamino oxidasa que es su principal actividad farmacológica. Hemos utilizado un modelo animal de esta enfermedad consistente en la transección del haz prosencefálico medial. Esta axotomía provoca la degeneración de las terminales dopaminérgicas del estriado y pérdida neuronal en la sustancia nigra, estando este proceso de muerte acompañado por un gran aumento de los niveles de estrés oxidativo medido como radicales hidroxilos por microdiálisis. El tratamiento con deprenilo disminuyó este estrés oxidativo aunque no fue capaz de impedir el proceso de degeneración provocado por la axotomía. Este dato es interesante, ya que pone de manifiesto que este aumento de los radicales observados después de la transección se produce como consecuencia de los cambios metabólicos que siguen a la axotomía y no como causa principal del proceso de muerte neuronal. No obstante el tratamiento compensó la pérdida de dopamina observada en la SN axotomizada, así como la disminución de la actividad y cantidad de la enzima tirosina hidroxilasa 14 días después de la lesión. El estudio de la población glial de la SN puso de manifiesto que el deprenilo al mismo tiempo que induce un aumento del número de astrocitos y de células microgliales es capaz de disminuir la activación de las moléculas MHCII, así como restringir esta activación microglial a la zona de muerte neuronal dopaminérgica y por lo tanto paliar el proceso inflamatorio que sigue a la axotomía. Este efecto del deprenilo podría dar explicación a la capacidad de este fármaco para mejorar a otros pacientes afectados de enfermedades neurodegenerativas, como es el caso de la enfermedad de Alzheimer.
