022 - Validación Del Proceso Aséptico En La Separación Y Marcaje De Leucocitos Con [99mTc]Tc-HMPAO Mediante El Método Media Fill
1Servicio de Medicina Nuclear, Hospital Universitario Marqués de Valdecilla, Grupo de imagen Molecular (IDIVAL), Universidad de Cantabria, Santander, España. 2Servicio de Microbiología, Hospital Universitario Marqués de Valdecilla, Grupo de Epidemiología y Mecanismos Patogénicos y Moleculares de Enfermedades Infecciosas y Microbiología Clínica (IDIVAL), Santander, España.
Objetivo: Validación del proceso aséptico durante el marcaje de leucocitos autólogos con [99mTc]Tc-HMPAO a través del método de simulación media fill, de acuerdo con las buenas prácticas radiofarmacéuticas.
Material y métodos: Para la simulación se empleó como medio de cultivo agar infusión cerebro corazón (ACC), testado previamente mediante ensayo de promoción con cepas control de S. aureus (ATCC 25923) y E. coli (ATCC 25922). La simulación del marcaje de los leucocitos se llevó a cabo siguiendo el procedimiento normalizado de trabajo de la Unidad, sustituyendo por medio de cultivo todos los principios activos del proceso (muestra sanguínea del paciente, acido-citrato-dextrosa (ACD), hidroxietilalmidón 6%(HES) y [99mTc]Tc-HMPAO. El proceso se realizó por triplicado en diferentes días. En cada simulación se obtuvieron 3 muestras control y 9 muestras del ACC de cada punto crítico considerado en nuestro proceso de marcaje celular y se enviaron a analizar (Vial 1: ACD, Vial 2: HES, Vial 3: muestra sanguínea, Vial 4: plasma rico en leucocitos, Vial 5: plasma libre de células, Vial 6: [99mTc]Tc-HMPAO, Vial 7: sobrenadante, Vial 8: dosis final, Vial 9: dosis inyectada). Las muestras se incubaron a 20-25 oC durante 7 días seguido de una incubación a 30-35 oC durante 7 días más. Al finalizar los 14 días de incubación, las muestras se analizaron cualitativamente mediante la observación de crecimiento microbiano o turbidez. Se realizaron test de endotoxinas en los viales 1, 2, 6 y 8 mediante el test LAL (limite 175 UI/V). Se efectuaron controles microbiológicos y de partículas ambientales durante la simulación en la cabina de flujo laminar y en el laboratorio.
Resultados: No se observó ninguna evidencia de turbidez en las muestras evaluadas. Las muestras control fueron positivas. Los niveles de endotoxinas fueron menores de 175 UI/V.
Conclusiones: El test media fill es una herramienta útil para validar el procedimiento de separación y marcaje leucocitario asegurando el cumplimiento de los requisitos de esterilidad en la manipulación de células sanguíneas.
