O-32 - NUEVOS BIOMARCADORES PROTEICOS EN VESÍCULAS EXTRACELULARES DE SUERO PARA EL DIAGNÓSTICO DE LA COLANGITIS ESCLEROSANTE PRIMARIA (PSC) EN PACIENTES CON COLITIS ULCEROSA (UC)
1Departamento de Enfermedades Hepáticas y Gastrointestinales, Instituto de Investigación Biodonostia-Hospital Universitario Donostia, Universidad del País Vasco, UPV/EHU, San Sebastián. 2Plataforma de Proteómica, CIC bioGUNE, CIBERehd, ProteoRed-ISCIII Parque Tecnológico y Científico de Bizkaia, Derio. 3Instituto Nacional de para el Estudio del Hígado y Enfermedades Gastrointestinales, CIBERehd, Instituto de Salud Carlos III, Madrid. 4Departamento de Medicina II, Saarland University Medical Center, Saarland University, Homburg, Alemania. 5Laboratorio de Enfermedades Metabólicas Hepáticas, Departamento de Cirugía General, Hepática y de Trasplante, “Medical University of Warsaw”, Varsovia, Polonia. 6Hospital de Cruces, Bilbao. 7Laboratorio de Exosomas, CIC bioGUNE, CIBERehd, Derio. 8Grupo de Medicina Traslacional, “Pomeranian Medical University in Szczecin”, Szczecin, Polonia. 9Departamento de Gastroenterología, “Università Politecnica delle Marche”, Ancona, Italia. 10Grupo de Hepatología Experimental y Vectorización de Fármacos, HEVEFARM, Instituto de Investigación Biomédica de Salamanca, IBSAL, Universidad de Salamanca, Salamanca. 11Centro de Investigación para la PSC, División de medicina del cáncer, cirugía y trasplante, Hospital Universitario de Oslo, Rikshospitalet, Oslo, Noruega. 12Instituto de Investigación de Medicina Interna, Hospital Universitario de Oslo, Rikshospitalet, Oslo, Noruega. 13Departamento de Gastroenterología, Hospital Universitario de la Princesa, Madrid. 14IKERBASQUE, Fundación Vasca para la Ciencia, Bilbao.
Introducción: La colangitis esclerosante primaria (PSC) es una enfermedad biliar crónica de etiología desconocida que aumenta la predisposición a padecer colangiocarcinoma (CCA) (5-15%). Además, la PSC se asocia en gran medida (80%) con presencia concomitante de enfermedad inflamatoria intestinal (IBD), principalmente colitis ulcerosa (UC). Así, los pacientes con IBD tienen mayor riesgo de desarrollar PSC (2-8%) y CCA (1%). Actualmente, no existen biomarcadores no invasivos sensibles y específicos para la detección precoz de la PSC en pacientes con UC, los cuales pueden ser especialmente relevantes para la monitorización de la progresión de la enfermedad y para aplicar estrategias terapéuticas adecuadas. Nuestro grupo ha demostrado recientemente que las vesículas extracelulares (EVs) de suero contienen biomarcadores proteicos para el diagnóstico diferencial de la PSC, CCA y carcinoma hepatocelular (HCC).
Objetivos: Investigar la presencia de biomarcadores proteicos sensibles y específicos en EVs de suero para el diagnóstico diferencial de PSC en pacientes con UC.
Métodos: Se aislaron EVs de suero de pacientes con PSC (n = 21), UC (n = 66) e individuos sanos (n = 62), utilizados como controles, mediante un protocolo bien establecido de ultracentrifugaciones y filtraciones seriadas. La caracterización de las EVs de suero se llevó a cabo a través de microscopía electrónica de transmisión (TEM), nanoparticle tracking analysis (NTA, Nanosight) e immnunoblot. El contenido proteico de estas vesículas fue determinado por medio de un análisis proteómico por espectrometría de masas.
Resultados: Las EVs de suero presentaron una morfología redondeada (TEM), un diámetro en torno a 180 nm (NTA) y marcadores proteicos de EVs tales como CD9, CD63 y CD81 (immmunobot) acorde con las características de exosomas o microvesículas de pequeño tamaño. Los perfiles proteicos (por espectrometría de masas) de las EVs de suero revelaron 45 proteínas diferencialmente expresadas en UC vs control, 66 en PSC-UC vs control, y 62 en PSC-UC vs UC con valor diagnóstico (sensibilidad y especificidad; p < 0,05). En particular, proteínas como la aminopeptidase N (AMPN), polymeric immunglobulin receptor (PIGR), G-protein coupeld receptor family C group 5 member C (GPC5C) and Pantetheinase (VNN1) están exclusivamente enriquecidas en pacientes con PSC-UC en comparación con pacientes con UC y controles sanos. Además, proteínas como complemento factor I (CFAI), Ficolin-2 (FCN2) y Fibronectin (FINC) se encuentran en menor abundancia en pacientes con PSC- UC en comparación con UC y controles sanos.
Conclusiones: Los perfiles proteómicos presentes en las EVs de suero de pacientes con PSC-UC y UC presentan potencial valor como herramientas diagnósticas mínimamente invasivas.
