Candida parasilopsis (C. parasilopsis) es considerada como la segunda o tercera especie de levadura que se aísla con mayor frecuencia en clínica, especialmente en candidemia asociada a catéter de neonatos con bajo peso al nacer que reciben nutrición parenteral1. Diferentes estudios basados en el análisis del ADN han permitido la división taxonómica de C. parasilopsis en 3 grupos: C. parasilopsis, C. otrhopsilosis y C. metapsilosis2. Estos estudios han puesto de manifiesto que las especies crípticas C. orthopsilosis y C. metapsilosis representan entre un 1 y un 10% de las infecciones/colonizaciones atribuidas a C. parasilopsis3. Diferenciar estas especies no solo tiene interés desde el punto de vista epidemiológico, sino también por la diferente sensibilidad a los antifúngicos que presentan estas especies4,5 por la capacidad de virulencia, ya que se ha comprobado que C. parasilopsis y C. orthopsilosis tienen un comportamiento similar mientras que C. metapsilosis posee un potencial de virulencia menor6. En septiembre de 2013, se implantó en el Hospital Puerta del Mar (Cádiz) la identificación de levaduras por el método de espectrometría de masas matrix-assisted laser desorption ionization time-of-fligh (MALDI-TOF). Nuestro objetivo ha sido determinar la frecuencia, distribución y perfil de sensibilidad de las especies crípticas de C. parasilopsis en muestras clínicas.
Se revisaron retrospectivamente los datos epidemiológicos, clínicos y microbiológicos de los aislamientos de C. parasilopsis, C. orthopsilosis y C. metapsilosis desde septiembre de 2013 hasta abril de 2014. La identificación se realizó por espectrometría de masas (MALDI-TOF)6, efectuando la extracción de proteínas mediante 2 protocolos: uno con ácido fórmico y otro con etanol/ácido fórmico. El análisis de los espectros proteicos se realizó en un espectrómetro de masas MALDI-TOF Microflex (Bruker Daltonics GmbH, Leipzig, Alemania). Los espectros fueron comparados de manera automática a partir de algoritmos integrados en el software del sistema con la base de datos Biotyper versión 3.0 (Bruker Daltonics GmbH, Bremen, Alemania). Las puntuaciones de confianza en la identificación a nivel de género y especie fueron los recomendados por el fabricante: <1,7 identificación no fiable; 1,7-2 identificación de género; >2 identificación de género y especie. El estudio de sensibilidad se llevó a cabo por el método de microdilución en caldo Sensititre Yeast One (Trek Diagnostic Systems, Reino Unido).
Durante el período de estudio se aislaron un total de 1.317 levaduras, de las cuales 113 (8,6%) correspondían al complejo C. parasilopsis: 7,7% C. parasilopsis, 0,6% C. orthopsilosis, 0,3% C. metapsilosis. La distribución de especies en el complejo –psilosis fue la siguiente: 101C. parasilopsis (89,4%), 8C. orthopsilosis (7,1%) y 4C. metapsilosis (3,5%) (tabla 1). En el estudio de sensibilidad frente a anfotericina B, fluconazol, itraconazol, posaconazol, voriconazol, caspofungina, micamicina y anidulafungina, solamente 3 cepas de C. parasilopsis mostraron una disminución de la sensibilidad a fluconazol (64mg/l). Las 3 especies fueron susceptibles al resto de antifúngicos, con CMI más bajas en C. orthopsilosis y C. metapsilosis7.
Prevalencia del complejo –psilosis en muestras clínicas
| Especie/epidemiología | C. parasilopsis Número (%) | C. orthopsilosis Número (%) | C. metapsilosis Número (%) |
|---|---|---|---|
| Exudado ótico | 36 (35,6) | 4 (50,0) | 2 (50,0) |
| Exudado vaginal | 26 (25,7) | 1 (12,5) | 1 (25,0) |
| Orina | 10 (9,9) | 2 (25,0) | 1 (25,0) |
| Sangre | 5 (4,9) | 1 (12,5) | 0 |
| Otras | 24 (23,7) | 0 | 0 |
| Hombres | 57 (56,5) | 5 (62,5) | 2 (50,0) |
| Mujeres | 44 (43,5) | 3 (37,5) | 2 (50,0) |
| Edad (rango) | 7 días-88 años | 25-82 años | 30-79 años |
En el período estudiado, el complejo C. parasilopsis supuso la tercera especie más frecuente de las levaduras aisladas en muestras clínicas. Las especies crípticas, C. otrhopsilosis y C. metapsilosis, representaron dentro del complejo cerca de un 11% de las infecciones/colonizaciones atribuidas a C. parasilopsis, un porcentaje algo superior al referido por otros autores, especialmente C. metapsilosis7–10. Todos los aislamientos de especies crípticas estuvieron relacionados con infecciones probadas. Observamos un mayor número de aislamientos en muestras de exudado ótico, dato no recogido en la literatura, quizás debido a que en esta localización clínica es también más frecuente C. parapsilosis. El método de espectrometría de masas (MALDI-TOF) se mostró como una excelente herramienta para identificar estas especies que precisan de técnicas moleculares para su diferenciación. La extracción de proteínas con etanol/ácido fórmico no mostró diferencias significativas con respecto a la de ácido fórmico.
